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驴源马链球菌兽疫亚种SYYZ44.1的分离鉴定及致病性研究
高函雅;付恩宁;魏晓龙;罗洁;何莹;吴勇;徐李依娜;崔舒溶;郝宝山;赵雪婷;靳文婷;王馨;赛福丁·阿不拉;阿得力江·吾斯曼;买占海;张伟;刘丹丹;本试验旨在探究新疆喀什某驴场驴腺疫致病菌及其生物学特性。从48份疑似患病驴鼻拭子样品中分离病原菌，用绵羊鲜血培养基分离纯化，经革兰染色、镜检及生化特性初步鉴定，采用PCR扩增16S rDNA基因，以BLAST比对和MEGA 7.0软件绘制遗传进化树进行同源性分析，再经PCR扩增鉴定毒力基因，进行小鼠致病性试验，观察小鼠症状和死亡率，测定半数致死量(LD50)，最后采用K-B纸片法考察菌株对6类12种药物的敏感性。结果显示，初步分离鉴定到1株具β溶血特性的革兰阳性链球菌；16S rDNA PCR扩增产物测序比对显示，该分离株与新疆马源SEZ(JQ726499.1和MT815608.1)同源性达99%且在同一分支，命名为SYYZ44.1；毒力基因检测显示其携带FneB、LytA和SeM基因；药敏试验K-B纸片法表明，该菌对β-内酰胺类抗生素氨苄西林、阿莫西林和利福平高度敏感，对环丙沙星、诺氟沙星、四环素等敏感性较低。本研究成功分离出1株驴源兽疫链球菌(SEZ)，命名为SYYZ44.1。该菌株对小鼠表现出较强的致病性，药敏试验提示临床防治可优先选用β-内酰胺类抗生素。本研究结果为进一步防控由驴源SEZ引起的驴腺疫提供了理论依据。
玄梗宁嚏丸质量标准提升研究
贾国芳;谢静;金文丽;王艳;隆旭红;刘光斌;本研究旨在提升玄梗宁嚏丸的质量控制标准。采用显微鉴别法对桔梗、茯苓等进行定性鉴别；采用薄层色谱法对玄参、苦杏仁等进行定性鉴别；以高效液相色谱法测定化橘红中柚皮苷的含量，采用Ultimate? XB-C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为0.1%磷酸(A)-乙腈(B)(体积比为78∶22)，检测波长283 nm。结果显示，显微特征鉴别专属性强，易于辨别；薄层色谱斑点清晰，分离良好，且阴性样品无干扰；柚皮苷在9.44～151.07 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好(r=1.000 0)，平均加样回收率为100.01%(RSD 0.94%，n=9)，方法精密度、稳定性与重复性良好(RSD均＜0.6%)。本研究建立的质量控制方法准确可靠、简便快速，可用于玄梗宁嚏丸的质量控制与评价控制。
结合化学计量学对不同种植方式甘草质量的差异评价
王昭国;陈晓青;薛自燕;孔瑾;通过探究仿野生种植与田间种植方式下甘草特征指标的差异，综合评价不同种植方式甘草质量差异，为人工规范化种植甘草提供技术指导。运用中药材显微鉴别（MI）、薄层色谱鉴别（TLC）、高效液相色谱含量测定（HPLC）等技术手段，结合主成分分析（PCA）和聚类分析（HCA）化学计量学方法以及中药色谱指纹图谱相似度评价系统对不同种植方式下甘草化学活性成分进行分析与比较。MI分析表明，不同种植方式下甘草的显微特征存在一定差异，田间种植甘草晶纤维和草酸钙方晶显著大于仿野生种植和空白对照；PCA和HCA分析表明，不同种植方式下甘草中甘草苷、甘草酸含量存在显著差异；TLC和HPLC指纹图谱分析表明，甘草中甘草酸和甘草苷化学活性成分积累表现为仿野生种植>田间种植>空白对照。因此，科学合理的田间管理技术可有效促进甘草中化学活性成分的积累，提升甘草的品质，为甘草规模化、规范化种植提供技术指导，能够进一步提升当地甘草种植产业的竞争力，服务地方经济发展。
猴痘病毒主要抗原蛋白的原核表达、纯化和反应原性评价
黄怀庆;李兴;苏洋;景伟;常慧慧;陈国华;房永祥;靳芳芳;景志忠;何小兵;段德勇;猴痘病毒（Mpox virus，MPXV）是一种人畜共患的正痘病毒，主要通过直接接触受感染的皮肤或体液而发生人与人之间的传播。针对MPXV持续传播的公共卫生挑战，本研究旨在利用原核表达系统制备MPXV的6个关键结构蛋白（A35R、M1R、B6R、A29L、H3L和E8L），并评价其反应原性，为开发相关诊断检测方法、治疗药物和新型疫苗产品提供候选靶点。首先对目标蛋白进行生物信息学分析，预测其理化性质、结构、抗原表位等生物学特征。随后，对编码蛋白胞外区的序列进行密码子优化并合成，克隆至pET-28a-SUMO载体中。重组质粒转化至E.coli BL21（DE3）感受态细胞后，通过对IPTG浓度、诱导温度与时间等条件优化，实现蛋白有效表达。表达产物经镍柱亲和层析纯化后，以特异性单克隆抗体和MPXV阳性血清为一抗，采用Western blot技术鉴定纯化蛋白的反应原性。结果显示，成功实现了6种重组蛋白的表达与纯化。其中，A35R、B6R、A29L主要以可溶性形式表达，M1R、H3L、E8L主要以包涵体形式表达，且A35R、M1R、B6R、A29L、H3L 5种重组蛋白均能与相应的单克隆抗体及MPXV阳性血清发生特异性反应。然而，E8L重组蛋白仅能被其特异性单克隆抗体识别，且与阳性血清反应较弱。本研究成功获得了5种具有良好反应原性的MPXV重组抗原蛋白（A35R、M1R、B6R、A29L和H3L），可作为新型血清学检测以及疫苗和药物研发的潜在候选物。该研究为猴痘防控技术和产品开发提供了重要的理论和实践依据。
甘草发酵前后活性成分变化及抗氧化作用研究
郑雪;高海宁;张东芝;尹珊;张勇;李彩霞;本研究以贝莱斯芽孢杆菌为菌种发酵甘草，比较甘草发酵前后活性成分变化并检测其抗氧化作用。采用比色法测定发酵前后甘草提取液中总黄酮、总酚和总皂苷含量，利用高效液相色谱法定量分析甘草提取液中芹糖甘草苷、甘草苷、甘草酸、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素的差异，通过ABTS+·、O2-、DPPH·自由基清除试验评价发酵前后甘草提取液的抗氧化活性。结果表明，发酵后甘草提取液中总黄酮(1.405 mg/mL)、总多酚(1.037 mg/mL)、总皂苷(8.821 mg/mL)含量均显著高于(P<0.05)发酵前(总黄酮0.647 mg/mL、总多酚0.404 mg/mL、总皂苷6.864 mg/mL)；高效液相色谱测定结果显示，发酵后甘草提取液中芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草素、甘草酸的含量均显著高于(P<0.05)发酵前，其中甘草酸含量为发酵前的2.66倍，甘草苷和异甘草苷含量相对于发酵前有所降低。发酵后甘草提取液对ABTS+·和O2-自由基清除率比发酵前分别提高了83.56%和39.56%，清除效果明显增强，对DPPH·清除率比发酵前降低了25.43%。综上所述，经发酵后甘草活性成分含量发生变化，抗氧化作用有所提高。
火术微粉原料药火炭母与麸炒白术饮片的DNA条形码分子鉴定
刘妍;杨洋;陈彦驹;郭日财;何永明;唐陆平;建立一种适用于火术微粉原料药（火炭母、麸炒白术饮片）的基因组DNA提取方法，实现通过DNA条形码技术鉴别该原料药的真伪，以保障中药原料基原物种的准确性。采用常规CTAB法、试剂盒法和改良CTAB法提取样品饮片的基因组DNA；PCR扩增其内部转录间隔区2（internal transcribed spacer 2，ITS2）序列，经测序、序列拼接、注释和BLAST分析，分别对市售不同产地、不同批次的21份火炭母饮片样本与20份麸炒白术饮片样本进行物种鉴定；从GenBank下载火炭母、白术各5种常见混伪品的ITS2序列，利用MEGA11软件计算火炭母、白术及其混伪品的种内和种间K2P遗传距离，并构建邻接（Neighbor-Joining，NJ）系统发育树，验证ITS2条码鉴别的有效性。结果显示，改良CTAB法提取的DNA纯度（A260/A280为1.81±0.13）和浓度（30.84±2.78 ng/μL）最优，PCR扩增成功率及测序成功率达100%；BLAST分析显示20份麸炒白术饮片均鉴定为白术Atractylodes macrocephala Koidz.，21份火炭母样本中有1份与葛根Pueraria montana var. lobata高度匹配，其余均鉴定为火炭母Polygonum chinense L.；K2P遗传距离及系统发育树分析显示，火炭母与麸炒白术的ITS2种内变异均较小，NJ系统发育树中，火炭母/白术与其混伪品可分别聚为单支。改良CTAB法提取炮制饮片DNA质量高，结合DNA条形码技术，可有效、准确实现火炭母和麸炒白术饮片与其常见混伪品的鉴别，为火术微粉原料药的鉴别提供了有力的技术支撑。
鸡血浆中连翘脂素UPLC-MS/MS检测方法的建立
孟冰冰;张康;徐国伟;王磊;郭志廷;刘淑琪;古雪艳;李建喜;张景艳;本研究旨在开发一种基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的方法，以实现对鸡血浆样本中连翘脂素含量的准确测定。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(100.0 mm×4.6 mm，粒径2.7 μm)进行色谱分离，流动相由甲醇和0.1%甲酸溶液组成，并采用梯度程序实施洗脱。质谱检测在负离子模式下以多反应监测(MRM)方式进行扫描。结果表明，连翘脂素在10～1 280 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2>0.99)；该方法日内精密度与日间精密度的相对标准偏差(RSD)均低于15%，准确度范围为99.24%～106.93%；平均提取回收率为86.90%～99.28%，基质效应为89.24%～104.72%；样品在各项储存条件下均表现出良好的稳定性。本方法具有良好的专属性、较高的准确度以及稳定的分析性能，适用于鸡血浆中连翘脂素的定量分析。
当归质量控制技术及道地性标志物研究进展
马江红;杨少鹏;潘遐;高晓昱;汪洁;杨正宇;当归作为我国传统大宗道地药材，以补血活血、调经止痛功效广泛应用于临床，其质量控制和道地性关乎临床疗效。近年来，随着色谱质谱联用技术、多组学技术及生物学信息工具的深度融合，当归的质量控制和道地性研究实现了跨越式发展，逐步建构了多维度、多层次的评价模式并取得一些突破。在质量控制方面，技术手段升级为色谱质谱联用技术，并通过建立当归特征指纹图谱并结合化学计量学方法，实现活性成分的精准定量。谱效关系明确了活性成分群与补血功效的量效关联，提升了质量评价的科学性与靶向性；分子生药学技术解析种质资源的遗传多样性以及酚酸、黄酮类合成关键基因的表达差异，揭示种质遗传背景与质量稳定性的内在关联；代谢组学技术从全局层面揭示了道地与非道地当归的代谢物差异谱，筛选出产地特异性的质量标志物。在道地性标志物研究方面，依托多学科的交叉融合，发现根际优势菌群可作为道地性关键微生物标志物；一些无机元素可作为道地当归的地域化学标志物；L-谷氨酰胺、Z-藁本内酯、总阿魏酸等化学成分可作为道地与非道地产区主要差异化学成分。然而，对根际微生物群落与次生代谢物合成的互作机制、无机元素调控道地品质的路径等核心科学问题阐释不充分，尚未完全揭示“产地-标志物-道地属性”的内在关联，需进一步构建“特征性化学+药理活性+道地性标志物”相关联的质量标准体系。此外，强化道地药材的保护与开发机制，通过政策引导与技术推广，推动道地当归产业的可持续发展。
中药传统制剂丸剂的研究进展
贾富涛;李芸芳;中药丸剂作为中医药经典固体制剂，在慢性病治疗中因便捷服用、药效持久等优势广泛应用。近年来，随着现代科技与传统制药理念的深度融合，其在生产技术、工艺优化、质量控制等方面取得进展。在生产技术与制备工艺方面，现代提取浓缩、智能粉碎混合、新型辅料应用以及微丸、滴丸等成型技术提升了丸剂的均匀性、稳定性和生产效率；真空脉动干燥、微波干燥及缓控释包衣等新技术进一步优化了丸剂的物理性质与释放性能。在质量控制方面，研究从单一成分测定转向多指标综合评价，指纹图谱、质量标志物、生物指纹图谱及中药对照制剂等整体性评价方法为质量一致性提供了科学支撑。丸剂的现代化发展仍面临一些挑战。丸剂的制备涉及多药材配伍与复杂工艺，质量控制体系还需进一完善，提升丸剂的质量均一性；加强多学科协同创新，结合粉体工程、智能制造优化工艺等进行跨学科系统攻关，采用缓控释、多层制剂、智能响应等技术推动中药丸剂向精准化、智能化发展。