2026年 01期
基于代谢组学探讨单宁酸对金黄色葡萄球菌的抑菌机制
王爽;彭玮;杨苗;伍忠旭;周永辉;为探讨单宁酸对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,本试验首先采用肉汤微量稀释法检测单宁酸对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)USA300菌株的最低抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC);随后采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)分析1/2 MIC浓度单宁酸对MRSA USA300代谢物的影响;最后对筛选得到的代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,进一步探讨单宁酸对MRSA的抗菌机制。结果显示,单宁酸对MRSA USA300的MIC为0.625 mg/mL,MBC为1.250 mg/mL;1/2 MIC(0.312 5 mg/mL)的单宁酸作用下筛选出7种差异表达代谢物(P<0.05,FC≥1.2或≤1/1.2)。其中,磷脂酰甘油(35:3)和2,6-二叔丁基-4-硝基苯酚表达水平显著上调(P<0.05),而(Z)-13-二十二烯酰胺、1-硬脂酰基-2-亚油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、2-羟基-2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸、D-3-磷酸甘油酸和磷脂酰甘油(23:0)表达水平则显著下调(P<0.05)。通过KEGG通路富集分析发现,这些差异代谢物富集于甘油磷脂代谢、糖酵解/糖异生、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等通路;进一步根据差异代谢物的KEGG信息,绘制代谢物与通路间的调控关系网络图,发现D-3-磷酸甘油酸处于核心位置,可能是单宁酸抑制MRSA的关键代谢物。本试验结果表明,单宁酸对MRSA具有抑菌作用,其机制可能与影响甘油磷脂代谢、糖酵解/糖异生、戊糖磷酸途径、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢通路有关,D-3-磷酸甘油酸可能是单宁酸抑制MRSA的关键代谢物。本研究可为进一步阐述单宁酸抑菌机制提供思路。
鹿茸菇多糖的提取工艺优化及其体外抗氧化作用研究
李艳华;周淑棉;何颖;胡庭俊;为实现鹿茸菇多糖的高效制备,本研究系统比较了水提法、酶解辅助水提醇沉法、微波水提法、超声水提法及冻融水提法对鹿茸菇多糖提取率与多糖含量的影响。在单因素试验基础上,通过正交试验法优化鹿茸菇多糖提取工艺,并通过DPPH·和ABTS+·清除试验探究该多糖的抗氧化活性。结果显示,水提法、酶解辅助水提醇沉法、微波水提法、超声水提法、冻融水提法多糖提取率分别为(4.63±0.40)%、(19.38±1.90)%、(7.32±0.47)%、(8.57±0.48)%、(11.46±0.50)%,多糖含量分别为(41.87±1.39)%、(77.03±1.76)%、(44.78±0.76%)、(42.57±1.36)%、(54.59±2.22)%,其中酶解辅助水提醇沉法效果最佳,故选用酶解辅助水提醇沉法提取鹿茸菇多糖。在此基础上,通过单因素与正交试验对酶解时间、酶浓度、固液比及提取次数4个关键参数进行优化,确定最佳工艺条件为提取3次,酶解时间150 min,酶浓度2.5%,固液比1∶20(g∶mL)。在此工艺下进行3次重复验证试验,鹿茸菇多糖含量分别为83.19%、82.08%和81.96%,多糖提取率分别为20.18%、21.34%和20.96%,工艺稳定可靠。体外抗氧化活性检测发现,由此制备的鹿茸菇多糖对DPPH·和ABTS+·均表现出良好的自由基清除活性,且清除效果呈现剂量依赖关系,质量浓度为4.0 mg/mL的鹿茸菇多糖对两种自由基的清除率分别高达80.17%和88.42%。综上所述,本研究建立了一种高效的鹿茸菇多糖提取工艺,并证实该多糖具有显著的抗氧化潜力,为鹿茸菇在功能性食品中的开发与应用提供了重要依据。
香连化滞丸治疗犬湿热泄泻的机制探索
万天;胡重重;李星瑶;范开;本研究围绕香连化滞丸治疗犬湿热泄泻的潜在机制开展临床试验与多组学整合分析。临床试验选择患犬19只(中药组10只、西药组9只),另设健康对照组。治疗前两组患犬证候总积分具有可比性,治疗后两组患犬证候总积分均显著降低(P<0.05),中药组与西药组差异不显著,但中药组患犬中医证候分项积分降低更为明确;中药组总有效率(100.0%)显著高于(P<0.05)西药组(88.9%)。通过网络药理学从12味药中筛得多类活性成分,构建“成分-靶点-通路”网络,核心枢纽涉及AKT1、STAT3、TP53、CASP3、EGFR、MTOR等,富集于PI3K-Akt、TNF、炎症性肠病等通路。收集试验犬粪便样本进行16S rDNA测序,结果显示,患犬发病时肠道厚壁菌门等益生菌数量减少、机会致病菌数量增加;经中药干预后,患犬肠道布劳氏菌属、瘤胃球菌群、地中海杆菌属等厌氧发酵菌数量回升,群落结构趋于健康。非靶向代谢组学分析提示,犬湿热泄泻主要扰动脂质与脂肪酸代谢;中药干预可促进核苷/糖代谢与辅因子合成,提升短链脂肪酸及抗氧化相关小分子丰度,降低氧化应激标志物丰度。Spearman相关性分析显示,发酵益生菌与丁酸/戊酸/己酸、γ-谷氨酰-半胱氨酸、肌肽等呈正相关,与肠球菌属、不动杆菌属等呈负相关。综上,香连化滞丸可能通过“多成分-多靶点-多通路”协同,重塑肠道微生态与代谢网络并维护黏膜屏障,从整体上改善湿热泄泻患犬的临床症状。
基于肥力评价对红芪栽培品与野生品的环境土壤研究
王龙博;张宇蓉;张玲花;张欢;康郑亮;李成义;王明伟;王燕;强正泽;本试验从野生药材品质常优于栽培品的现象出发,探究甘肃红芪主产区栽培地土壤与野生地土壤的肥力差异,旨在从土壤环境角度阐释“质优肥低”的成因,为通过仿生栽培提升红芪药材品质提供依据。采集甘肃红芪主产区武都、宕昌、定西等地的37份土壤样品,测定其全氮、全磷、全钾、有机质、速效磷、速效钾含量。采用主成分分析法(PCA)计算土壤肥力指数(IFI),并利用方差分析、相关分析及回归分析比较不同产区栽培地土壤与野生地土壤的肥力差异。结果显示,武都、宕昌及定西三地土壤IFI均值分别为0.263 0、0.276 2与0.264 0,均属中等肥力水平;栽培地土壤IFI均值(0.298)显著高于野生地(0.251),且二者全磷含量存在显著性差异(P<0.05);PCA分析表明,栽培地与野生地的土壤肥力结构无根本性差异。栽培活动虽能提升土壤全磷含量及整体肥力,但未改变土壤固有的肥力结构。野生红芪在长期适应中形成的低磷胁迫环境可能是驱动次生代谢产物积累,从而实现质优的关键。因此,在红芪人工栽培中,实施“控磷、稳氮钾”的施肥策略,模拟野生土壤的低磷环境,是提升药材品质的可行途径。
厚皮马拉色菌对中药单体及常用抗真菌药的敏感性评价与联合用药筛选研究
吴俊仪;傅云扉;韩依辛;邱菲;林然;康桦华;涂杜;徐志宏;本研究旨在评价厚皮马拉色菌对中药单体及常用抗真菌药的敏感性,并筛选具有协同抑菌作用的联合用药方案。通过抑菌试验检测16种中药单体和抗真菌药对3株厚皮马拉色菌临床分离株(FS05、SZ06、GZ07)的抑菌效果;进一步以耐药性最强的SZ06株为对象,采用微量稀释法测定高度敏感药物对该菌的MIC和MBC,并通过棋盘稀释法评估药物联用效果。结果显示,厚皮马拉色菌对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑等常用抗真菌药高度敏感,对大蒜素、肉桂醛、丁香酚和茴香醛等中药单体高度敏感;上述高度敏感药物对SZ06菌株的MIC值分别为0.25 mg/L、4.00 mg/L、128.00 mg/L、7.81 mg/L、15.60 mg/L、125.00 mg/L和62.50 mg/L。联合药敏试验表明,大蒜素与茴香醛、大蒜素与肉桂醛、大蒜素与丁香酚、茴香醛与肉桂醛联用时FICI均小于1,表现出协同作用,可显著延长细菌生长对数期。本研究表明,大蒜素与肉桂醛的联合用药方案对厚皮马拉色菌具有抑菌潜力,可为药物开发和防治该菌引起的皮肤感染提供参考。
蒸汽爆破辅助中药提取技术研究进展
郭宽;冯娜;王书学;范迎赛;宫新城;蒸汽爆破辅助中药提取技术通过高温高压蒸汽渗透植物组织,瞬时泄压将内能转化为机械能,破坏细胞壁中纤维素、半纤维素与木质素的连接结构,形成多孔通道,从而促进有效成分溶出。其核心优势为提取效率高,绿色环保无化学残留,部分中药活性成分可发生有效转化,工艺适配性强,可实现“一爆多提”。蒸汽爆破的作用效果与中药的材质密切相关,适用于真菌类、根茎类、木质/果壳类、叶类等富含纤维、细胞壁致密的中药,不适用于含水量高或极度热敏感的中药。蒸汽爆破作为预处理手段,与超声提取、热水提取、响应面法等技术联用可产生协同效应,进一步提高提取效率并保护活性成分,为工业化应用提供多元路径。目前,该技术仍存在不同中药的蒸汽爆破工艺参数标准化不足、工业化设备研发滞后、基础研究不深入等问题。未来,应进一步加强基础研究,并围绕工艺标准化、设备智能化、应用场景等研究方向突破,促进蒸汽爆破技术成为推动中药产业绿色化、高效化、规模化发展的核心支撑技术之一,推动中药产业从粗放加工向精准制造转型,助力中药现代化发展。
犊牛腹泻的常见病因及中兽药防治研究进展
孟凡国;肖娜;支龙彬;张雨;郭子明;何欣;犊牛腹泻导致犊牛生长性能下降、免疫力降低甚至死亡,部分人畜共患病原还威胁公共卫生安全,严重影响养殖效益。该病病因包括感染性因素与非感染性因素,前者包括细菌、病毒、寄生虫等,后者涉及自身免疫力低下、环境应激、营养失衡等,不同病因引发的临床症状存在差异。中兽药复方具备多靶点协同作用,广泛应用于犊牛腹泻的防治。研究表明,在饲料中分别添加蒲公英提取物、甘草提取物、生姜提取物、紫苏子提取物以及多种中药多糖均可降低养殖场犊牛腹泻的发病率。中兽药复方可通过调节免疫功能、修复肠道黏膜屏障、调控肠道微生态平衡等多种途径改善犊牛腹泻。未来,在中兽药研制方面可聚焦中兽医辨证论治和整体疗效研究,优化剂型并提高使用便捷性,贯彻防重于治的原则,加强饲养管理,以提高犊牛腹泻的综合防控效果。
响应面法优选凤眼草口服液提取工艺研究
周慧婷;刘宇;张红娟;杨珍;郝宝成;邵丹;吴迪;吴雪琴;顾强文;王胜义;优化凤眼草口服液的水提工艺参数,确定最佳提取工艺。以槲皮素、山柰酚含量及浸膏得率的总评归一值(OD值)为综合评价指标,通过单因素试验考察料液比、提取时间和回流次数对提取效果的影响,确定各因素的适宜范围。在此基础上,采用Box-Behnken中心组合设计原理,运用响应面分析法对凤眼草口服液的水提工艺进行优化。响应面分析结果显示,建立的数学模型决定系数R2达0.990 3,校正决定系数RAdj2为0.977 9,两者高度接近,表明所建立模型拟合度良好。方差分析显示模型极显著(P<0.01),而失拟项不显著(P>0.05),进一步证实了模型的可靠性。得到最佳水提工艺条件为料液比1:17(g:mL),提取时间2 h,回流次数3次。在上述工艺条件下,口服液中槲皮素含量为1.07 mg/mL,山柰酚含量为0.17 mg/mL,浸膏得率为25.65%,OD平均值为0.940,RSD为1.2%。基于响应面法优化的凤眼草口服液水提工艺稳定可行,工艺参数科学合理,可为凤眼草制剂的进一步开发及工业化生产奠定基础。
香连化滞水丸剂的制备及质量检测
胡重重;刘嘉怡;万天;范开;本研究对香连化滞水丸剂开展工艺优化与质量评价,在传统处方(黄连、木香等12味药)基础上,以玉米淀粉为辅料并采用塑制法制丸,控制丸径约5 mm,经60℃热风干燥得均一圆整的水丸;通过性状与外观一致性、丸重与含水量等指标测定来评价成品稳定性,并采用显微鉴别与薄层色谱鉴别完成同一性鉴别(特征显微颗粒、Rf与显色均与对照品相符);采用C18-HPLC外标法(λ=350 nm,乙腈与0.1%磷酸体积比为42∶58,含0.10%十二烷基磺酸钠),系统适用性达标,于tR≈19.24 min检出与对照品一致的小檗碱峰,测得样品中盐酸小檗碱含量为4.0 mg/g,符合《中华人民共和国药典》(2020年版)规定(≥2 mg/g)。结果表明,本研究建立工艺可稳定制得适用于伴侣动物口服的香连化滞水丸,处方同一性明确,关键成分含量可控,成品质量均一且具备良好可制备性,具有推广应用前景。
高效液相色谱-波长切换法同时测定养血安神片中蟛蜞菊内酯等3种成分的含量
张燕;杨玺文;方剑儒;于喆源;建立高效液相色谱-波长切换法同时测定养血安神片中蟛蜞菊内酯、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)和大黄素的含量。采用Shim-pack GWS C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;柱温35℃;通过二极管阵列检测器切换不同波长进行检测:蟛蜞菊内酯(351 nm)、二苯乙烯苷(320 nm)、大黄素(254 nm)。结果显示,3种成分分离度良好,线性关系(r>0.999)、精密度(RSD<2%)、重复性(RSD<2%)及加样回收率(95.32%~102.00%)均符合要求。该方法快速准确、重复性好,适用于养血安神片多指标质量评价。